Со проширувањето на обемот на култури и зголемувањето на густината на културите, болеста на Apostichopus japonicus станува сè позначајна, што донесе сериозни загуби во аквакултурната индустрија. Болестите на Apostichopus japonicus се главно предизвикани од бактерии, вируси и цилијати, меѓу кои синдромот на гниење на кожата предизвикан од Vibrio brilliant е најсериозен. Со влошувањето на болеста, телесниот ѕид на Apostichopus japonicus се распаѓа, формирајќи сини и бели дамки, и на крајот се саморастворува до смрт, растворајќи се во назална слуз како колоид. Во традиционалната превенција и третман на болести, широко се користат антибиотици. Но, долготрајната употреба на антибиотици не само што носи скриена опасност од бактериска резистенција и остатоци од лекови, туку носи и безбедност на храната и загадување на животната средина. Затоа, развојот на незагадувачки, безрезидуален, безбеден препарат за намалување на болеста на морската краставица е една од жариштата на тековните истражувања.

Калиум диформатот е бел кристален лабав прав, сув и безвкусен. Тоа е првиот додаток во исхраната без антибиотици одобрен од Европската Унија како замена за антибиотици. Може да го поттикне растот на култивираните животни, да го инхибира растот на штетните бактерии и да ја подобри цревната средина. Калиум диформатот може значително да го подобри растот и приносот на водните организми.

1 Резултати од тестот

1.1 Ефекти на калиум диформат во исхраната врз растот и преживувањето на морската краставица Apostichopus japonicus

Специфичната стапка на раст на Apostichopus japonicus значително се зголеми со зголемувањето на содржината на калиум диформат во исхраната. Кога содржината на калиум диформат во исхраната достигна 0,8%, односно кога содржината на калиум диформат во исхраната беше 1,0% и 1,2%, специфичната стапка на раст на Apostichopus japonicus беше значително повисока од онаа со другите третмани, но немаше значајна разлика (P > 0,05) (табела 2-2). Стапката на преживување на морската краставица беше 100% во сите групи.

1.2 Ефекти на диететскиот калиум диформат врз имунолошките индекси на морската краставица Apostichopus japonicus

Во споредба со контролната група, различните нивоа на калиум дикарбоксилат можеле да го подобрат фагоцитниот капацитет на коеломоцитите и производството на O2 – во различен степен (табела 2-3). Кога бил додаден калиум диформат во количини од 1,0% и 1,2%, фагоцитната активност на коеломоцитите и производството на реактивни кислородни видови O2 – кај морската краставица биле значително повисоки од оние во контролната група, но немало значајни разлики помеѓу групите со 1% и 1,2% калиум диформат, или помеѓу другите нивоа на калиум диформат и контролната група. Со зголемувањето на содржината на калиум дикарбоксилат во храната, се зголемиле SOD и NOS на морската краставица.

1.3 Ефект на диететскиот калиум диформат врз отпорноста на морската краставица на инфекција со Vibrio brilliant

1,4 дена по предизвикот, кумулативната смртност на морската краставица во контролната група беше 46,67%, што беше значително повисоко од онаа во групите со 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% калиум диформат (26,67%, 26,67%, 30%, 30% и 23,33%), но немаше значајна разлика со групата за третман со 0,2% (38,33%). Морталитетот на морската краставица во групите со 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% калиум диформат немаше значајна разлика.

2. Дискусија

2.1 Ефект на калиум дикарбоксилат врз растот на морската краставица Apostichopus japonicus

Кај животните, механизмот на дејство на калиум дикарбоксилатот е главно да влезе во гастроинтестиналниот тракт, да ја подобри гастроинтестиналната средина, да ја регулира pH вредноста и да ги уништи штетните бактерии (Ramli и sunanto, 2005). Покрај тоа, калиум диформатот може да ја поттикне апсорпцијата на хранливи материи во храната и да ја подобри сварливоста и стапката на искористување кај култивираните животни. При примена на водни животни, експериментите покажаа дека калиум диформатот може значително да го подобри растот и стапката на преживување на ракчињата (he Suxu, Zhou Zhigang, et al., 2006). Во оваа студија, растот на морската краставица (Apostichopus japonicus) беше поттикнат со додавање на калиум дикарбоксилат во храната, што беше во согласност со резултатите од примената на калиум дикарбоксилат кај прасиња и прасиња за доење објавени од verland. M (2000).

2.2 Ефект на калиум дикарбоксилат врз имунитетот на морската краставица Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus има ист одбранбен механизам како и другите ехинодерми, кој е комплетиран со клеточен и неклеточен (хуморален) имунолошки одговор. Главно се користи за идентификување и елиминирање на туѓи тела што влегуваат во телото на животното, или претворање на туѓи тела во безопасни супстанции и за поправка на рани. Клеточниот имунолошки одговор на ехинодермите е комплетиран од различни коеломоцити, кои го формираат одбранбениот систем на ехинодермите. Главните функции на овие клетки вклучуваат фагоцитоза, реакција на цитоксин и производство на антибактериски супстанции на ниво на коагулација (kudriavtsev, 2000). Во процесот на фагоцитоза, коеломоцитите можат да бидат индуцирани од бактерии или компоненти на бактерискиот клеточен ѕид за да произведуваат реактивни кислородни видови (ROS), вклучувајќи no, H2O2, oh и O2-. Во овој експеримент, додавањето на 1,0% и 1,2% калиум дикарбоксилат во исхраната значително ја зголеми фагоцитната активност на коеломоцитите и производството на реактивни кислородни видови. Сепак, механизмот на зголемување на фагоцитната активност и производството на O2 од страна на калиум диформат треба дополнително да се проучи.

2.3 Ефект на калиум дикарбоксилат врз цревната флора на морската краставица Apostichopus japonicus

Калиум дикарбоксилатот може да се разгради во мравја киселина и формат во слаба алкална средина и да влезе во микробните клетки преку клеточната мембрана. Тој може да ја промени животната средина на штетните микроорганизми како што се Escherichia coli и Salmonella со промена на pH вредноста во клетките и спречување на нивната репродукција, со што се регулира цревната микроеколошка рамнотежа (eidelsburger, 1998). Ефектот на калиум дикарбоксилатот врз цревната микрофлора, макроскопски, H+ произведениот со распаѓање на калиум дикарбоксилатот ја намалува pH вредноста во цревата и го инхибира растот на цревната микрофлора. Микроскопски, H+ влегува во бактериските клетки преку клеточната мембрана, директно ја уништува активноста на интрацелуларните ензими, влијае на метаболизмот на микробните протеини и нуклеинската киселина и игра улога во стерилизацијата (Roth, 1998). Резултатите покажаа дека калиум диформатот имал мал ефект врз вкупните цревни бактерии на морската краставица, но може значително да го инхибира бројот на вибриони.

2.4 Ефект на калиум дикарбоксилат врз отпорноста на болести кај морската краставица Apostichopus japonicus

Vibrio splendens е патогена бактерија на синдромот на гниење на кожата кај морската краставица, која е штетна за производството и одгледувањето на морската краставица. Овој експеримент докажа дека додавањето на калиум дикарбоксилат во храната ја намалува смртноста кај морската краставица инфицирана со Vibrio brilliant. Ова може да биде поврзано со инхибиторниот ефект на калиум диформатот врз Vibrio.

3 Заклучок

Резултатите покажаа дека калиум диформатот во исхраната имал значаен ефект врз растот на Apostichopus japonicus, имал позитивен ефект врз неспецифичниот имунитет на Apostichopus japonicus и го засилил хуморалниот и клеточниот имунитет на Apostichopus japonicus. Додавањето на калиум дикарбоксилат во исхраната значително го намалило бројот на штетни бактерии во цревата на морската краставица и ја зголемило отпорноста на болести на морската краставица инфицирана со Vibrio brilliant. Како заклучок, калиум дикарбоксилатот може да се користи како засилувач на имунитетот во храната за морска краставица, а соодветната доза на калиум дикарбоксилат е 1,0%.